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ME-Calcium甘露醇糖類檢測專用柱

發布時間: 2018-09-17 10:28 5027 次瀏覽

ME-Calcium系列色譜柱專為高效分離制備水溶性或部分水溶性的有機化合物而設計，可用于分離糖類、有機酸、多肽和細胞代謝物中的生物有機小分子。ME-Calcium系列固定相是在低交聯度（5%、8%和10%）的聚苯乙烯/二乙烯基苯（PS/DVB）顆粒（5、10 μm）表面鍵合磺酸基團（-SO3H），即為ME-Calcium填料；若在此填料上繼續絡合不同的離子則形成不同類型的填料。如絡合離子為鈣離子（Ca2+），則為ME-Calcium填料；如絡合離子為鉛離子（Pb2+），則為ME-Calcium Pb填料；如絡合離子為鉀離子（K+），則為ME-Calcium 填料；如絡合離子為鈉離子（Na+），則為ME-CalciumN填料。

5和10 μm ME-Calcium填料電鏡圖

ME-Calcium色譜柱技術參數表

類型			ME-Calcium	ME-Calcium	ME-Calcium	ME-Calcium	ME-Calcium
基質			PS/DVB	PS/DVB	PS/DVB	PS/DVB	PS/DVB
粒徑 (μm)			5, 10	5, 10	5, 10	5, 10	5, 10
交聯度			5%, 8% and 10%	5%, 8% and 10%	5%, 8% and 10%	5%, 8% and 10%	5%, 8% and 10%
固定相			-SO₃H	-(SO₃)₂Ca	-(SO₃)₂Pb	-SO₃K	-SO₃Na
pH穩定性			1 – 3	5 – 9	5 – 9	5 – 9	5 – 9
******耐壓 (psi) ⁽¹⁾	10% 交聯度	10 μm	1,500	1,500	1,500	1,500	1,500
	10% 交聯度	5 μm	1,000	1,000	1,000	1,000	1,000
	8% 交聯度	10 μm	1,000	1,000	1,000	1,000	1,000
	8% 交聯度	5 μm	800	800	800	800	800
	5% 交聯度	10 μm	600	600	600	600	600
	5% 交聯度	5 μm	400	400	400	400	400
推薦流動相			2.5 mM H₂SO₄ 或0.1% H₃PO₄	H₂O	H₂O	H₂O	H₂O
推薦流速 (mL/min)⁽²⁾	7.8x300 mm柱		0.4-0.8	0.4-0.8	0.4-0.8	0.4-0.8	0.4-0.8
推薦流速 (mL/min)⁽²⁾	4.6x300 mm柱		0.1-0.30	0.1-0.30	0.1-0.30	0.1-0.30	0.1-0.30
******耐受溫度 (^oC)			85	85	85	85	85

(1) 對于7.8x300 mm柱在******溫度下而言，并扣除儀器的背壓。
(2) 對于固定相為5 μm的5%交聯度樹脂、規格為7.8x300 mm柱的流速是0.1 to 0.15 mL/min。

ME-Calcium甘露醇糖類檢測專用柱特點：

● 均勻一致的粒徑確保了高分辨率和分離的高效性

● 交聯度：5%、8%和10%

● 與絕大多數水系流動相容（包括純水）

● 離子形態選擇范圍寬：H+、Ca2+、Pb2+、K+和Na+

● ME-Calcium柱的pH適用范圍為1~3，其他類型ME-Calcium柱的pH適用范圍為5~9

● 包括分析柱和制備柱

均一的粒徑

ME-Calcium 固定相粒徑分布極窄，5 μm為5.0±0.2 μm，10 μm為10.0 ± 0.2 μm。如此均一的粒徑分布確保了賽分產品具有高的分離效率和回收率。圖1表明，分離單糖試驗中，ME-Calcium 色譜柱比其他品牌產品具有更高的分離效率。

圖1. 相同分離條件下，在ME-Calcium (5 μm, 8%交聯度, 7.8 x 300 mm)柱和其它品牌相同規格鈣柱上分離6種單糖效果對比。

流動相:     H₂O
流速:         0.60 mL/min
溫度:         85 ℃
進樣量:     20 μL
檢測:         RI

不同離子態

ME-Calcium樹脂多種可選離子態使得賽分ME-Calcium系列柱可廣泛用于各種不同基質中糖分子、糖醇和其他水溶性物質的******分離。例如，樹膠醛糖、核糖醇、阿糖醇很難在H柱上分離，卻能在Ca柱上實現******分離；木糖、半乳糖和甘露糖在Ca柱上是一個重疊峰，而在Pb柱上則能夠依次單獨流出。

不同離子態的選擇

離子	應用
H	發酵產物、含有機酸的果汁、醇類和糖類
Ca	含大量果糖的玉米糖漿中的糖類、尤其適用于單糖、二聚糖、三聚糖、四糖及糖醇的分離
Pb	木制品中的戊糖和己糖含有蔗糖、乳糖等的奶制品
K	蔗糖、蜜糖、玉米糖漿、甜菜糖及其他含有糖類植物產品（含有甜菜堿、******基氯化銨等兩性離子的）甘草膦
Na	低聚糖，尤其在含有大量無機鈉離子的情況下，如蜂蜜。

低交聯度

ME-Calcium樹脂的低交聯度使其在流動相中可以適當的溶脹，尤其在高溫條件下這是實現大多數分離任務的典型模式。這種溶脹可以優化分離時的比表面積、滲透性、容量、選擇性，及改變離子強度。PS/DVB粒子的交聯度越低，樹脂結構***越開放，從而使更大分子量的多聚糖也有良好滲透性。圖2表明，在5% ME-Calcium 柱上，聚己糖(G6)可以很好的從基質中分離，并且還能看到聚庚糖(G7)和聚辛糖(G8)的兩個峰得到了分離；而在8% ME-Calcium上不但沒有G7和G8的峰，連G6的峰都不太明顯。

圖2. 不同交聯度ME-Calcium (5 μm, 7.8 x 300 mm)柱上麥芽糊精和甘油的流出曲線

色譜柱:      ME-Calcium Ca-NP5
流動相:     H₂O
流速:          0.20 mL/min
溫度:          85℃
進樣量:      20 μL
檢測波長:   192 nm
樣品:       Glucidex (100 mg/mL) and glycerol (10 mg/mL) (G3 to G7 refer to oligosaccharides)

******的穩定性

ME-Calcium HPLC柱優良的制造工藝和******的填裝技術******了其具有高的穩定性。即使是在升高溫度的條件下，ME-Calcium樹脂也能在純水和其他水緩沖體系中保持穩定。圖3表明，55℃下，6天內連續沖洗578倍柱體積，酸的保留時間僅改變了1%。

圖3. ME-Calcium (5 μm, 8%交聯度)柱55℃下連續用5 mM H₂SO₄沖洗后分離有機酸色譜圖

色譜柱:    4.6x 250 mm
流動相: 5 mM H₂SO₄
流速:     0.30 mL/min
溫度:        55℃
進樣量:     20 μL
檢測:       RI
樣品:         1, Citric acid (50 mM); 2, Acetic acid (100 mM)

穩定的批間重現性

由于采用了可控的表面化學修飾技術并嚴格監控聚合物樹脂的生產過程，ME-Calcium柱具有很高的批間重現性。圖4表明，不同批次間的保留時間誤差在0.3%以內。

圖4. 三個不同批次ME-Calcium (10 μm, 8%交聯度)柱分離有機酸色譜圖

色譜柱: 7.8x300 mm
流動相:   2.5 mM H₂SO₄
流速:     0.6 mL/min
溫度:       55 ℃
進樣量:    5 μL
檢測:        RI
樣品:       Mixture of Citric acid, Succunic acid, Formic acid, Acetic acid

多種分離機理共同作用

ME-Calcium樹脂表面的抗衡離子(H⁺，Ca²⁺，Pb²⁺，K⁺和Na⁺)能緩和分離過程。通常，分離的過程涉及兩種或兩種以上的機理同時作用，包括體積排阻、離子排斥、離子交換、配體交換、反相作用及正相作用。對多糖類樣品來說，體積排阻機理是主要的作用機理，如圖4中寡聚糖的分離。而分離單糖時的主要機理則主要是配位效應，例如Ca型柱中分離葡萄糖的α、β-異構體。在實現蜂蜜樣品的分離過程中，首要的機理為離子排斥作用，該作用使得無機鈉離子通過孔隙被洗脫下來。而體積排阻和配體交換作用則依次作用于寡聚糖和單糖的分離。對于分離有機酸用的ME-Calcium H型樹脂來說，反相作用和離子排阻作用均為首要機理。疏水性和pKa同時影響樣品組成的保留時間。這一特性使得ME-Calcium型樹脂非常適合于監測發酵過程中成分的變化。

ME-Calcium


產品名稱	粒度	交聯度	規格	訂貨號
ME-Calcium	10 μm	5%	4.6x50 mm	511331-4605
ME-Calcium	10 μm	5%	4.6x300 mm	511331-4630
ME-Calcium	10 μm	5%	7.8x50 mm	511331-7805
ME-Calcium	10 μm	5%	7.8x100 mm	511331-7810
ME-Calcium	10 μm	5%	7.8x300 mm	511331-7830
ME-Calcium	10 μm	5%	10x300 mm	511331-10030
ME-Calcium	10 μm	8%	4.6x50 mm	511331-4605
ME-Calcium	10 μm	8%	4.6x300 mm	511331-4630
ME-Calcium	10 μm	8%	7.8x50 mm	511331-7805
ME-Calcium	10 μm	8%	7.8x100 mm	511331-7810
ME-Calcium	10 μm	8%	7.8x300 mm	511331-7830
ME-Calcium	10 μm	8%	10x300 mm	511331-10030
ME-Calcium	10 μm	10%	4.6x50 mm	511331-4605
ME-Calcium	10 μm	10%	4.6x300 mm	511331-4630
ME-Calcium	10 μm	10%	7.8x50 mm	511331-7805
ME-Calcium	10 μm	10%	7.8x100 mm	511331-7810
ME-Calcium	10 μm	10%	7.8x300 mm	511331-7830
ME-Calcium	10 μm	10%	10x300 mm	511331-10030

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